%0 Journal Article
%T 用于环境污染物遗传毒性评价的重组发光细菌载体的构建
%A 何苗
%A 施汉昌
%A 蔡强
%A 黄新新
%J 环境科学
%D 2008
%X 基因重组发光菌在水质毒性的评价中具有重要的作用，本研究从污染物遗传毒性损伤的机制出发，构建2种遗传毒性新型基因重组发光菌载体PUCD-uvrA、PUCD-alkA.用PCR法从大肠杆菌W3110中扩增uvrA、alkA基因，将其与pGEM-T easy载体连接后测序.测序正确的uvrA、alkA片段及PUCD615载体均用BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ双酶切，连接后电转化导入宿主菌JM109.挑取克隆，提取质粒用PCR鉴定，阳性克隆再进行测序.结果表明，uvrA、alkA基因PCR扩增出的片段为237　bp、326　bp，测序结果与GenBank中uvrA、alkA序列进行BLAST比对，同源性均为99％，表明扩增序列正确.与PUCD615载体连接后的测序结果表明，uvrA、alkA基因已正确地插入到PUCD615的多克隆位点，方向和读码框正确，2种载体构建成功.通过优化连接及转化条件，可将大片段的PUCD615载体与短片段的插入序列连接成功，构成重组载体
%K 重组发光菌 遗传毒性 PUCD-uvrA、PUCD-alkA 载体
%U http://www.hjkx.ac.cn/hjkx/ch/reader/view_abstract.aspx?flag=1&file_no=20081130&journal_id=hjkx