%0 Journal Article
%T 实时荧光定量PCR方法应用于药品无菌快速检测的研究
%A 周继昌
%A 应国红
%A 李军
%A 王晓冲
%A 王晓炜
%J 中国现代应用药学报
%D 2013
%X 目的 建立应用实时荧光定量PCR进行无菌快速检测的方法。方法 选取金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌，用裂解试剂盒抽提细菌基因组DNA，进行实时荧光定量PCR检测，并应用叠氮溴化丙锭(PMA)抑制样品中死菌基因组DNA的PCR扩增。结果 PMA能有效去除样品中死菌干扰，针对16S rRNA基因保守序列进行扩增的荧光定量PCR方法具有较高的灵敏度。在金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌检测中，最低含菌量组与阴性对照组Ct值有明显差异(P<0.05)，其最低检出限为2 CFU/PCR。在对人工污染药品的无菌检测中，该方法与药典检测方法结果一致。结论 进行无菌检查时，采用PMA去除样品中死菌基因组DNA干扰，以裂解试剂盒抽提细菌基因组后用荧光定量PCR分析样品中细菌污染，可将检测时间缩短到4 h左右，操作简单，灵敏性高，可应用于药品无菌检查的快速筛查
%K 荧光定量PCR
%K 叠氮溴化丙锭
%K 细菌污染
%K 快速检测
%U http://www.chinjmap.com/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=231599&flag=1