%0 Journal Article %T 发菜NdhK的抗体制备与蛋白表达 %A 郭正红 %A 魏兰珍 %A 王全喜* %J 植物研究 %D 2012 %R 10.7525/j.issn.1673-5102.2012.02.013 %X 摘要: 发菜是一种陆生蓝藻,分布于一些干旱和半干旱区域。其NADPH脱氢酶(NDH-1)是一种重要的光合膜蛋白复合体,参与CO2吸收、围绕光系统Ⅰ的循环电子传递和细胞呼吸。为研究该物种中ndhK基因的功能,本研究利用特异性引物,通过PCR方法从发菜中扩增ndhK基因并克隆到原核表达载体pET-32a上,得到表达载体pET-32a-ndhK,将其转入大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,得到分子量大小为43 kDa的融合蛋白NdhK。随后,采用亲和层析,对融合蛋白进行纯化回收,并以此回收蛋白作为抗原进行免疫,制备NdhK的多克隆抗体。最后,利用Western blot蛋白免疫印迹对所得抗体的特异性进行验证。从而为进一步探索发菜ndhK基因的功能以及发菜中NDH-1复合体各亚基的作用进行前期准备 %K 发菜 %K NdhK %K 多克隆抗体 %K 蛋白表达 %U http://bbr.nefu.edu.cn/CN/10.7525/j.issn.1673-5102.2012.02.013