%0 Journal Article
%T 长春花萜类吲哚生物碱生物合成途径中重要酶(DXR、SLS、G10H、STR)基因的克隆与表达
%A 韩　梅
%A 赵　博
%A 安志刚
%A ThomasRausch
%A 祖元刚*
%J 植物研究
%D 2007
%R 10.7525/j.issn.1673-5102.2007.05.013
%X 摘要： 以分离提取的2周龄长春花植物幼苗总RNA为模板，经两步Gateway-PCR反应扩增得到长春花萜类吲哚生物碱合成途径中编码重要酶：5—磷酸脱氧木酮糖还原酶（DXR）、次番木鳖苷合成酶 （SLS）、牻牛儿醇-10羟化酶（G10H）和异胡豆苷合成酶（STR）的cDNA 基因片段。利用BP重组酶将扩增片段克隆到Gateway化的入门载体pDONR201中，并进行测序验证。测序后的基因通过 LR重组酶的作用转移到带有HIS标签的目标载体pETG10A中，构成重组表达质粒，转化大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导得到了高效表达，通过Ni-TED树脂纯化方法得到了高纯度的蛋白
%K 长春花
%K 萜类吲哚生物碱
%K 生物合成途径
%K Gateway克隆
%U http://bbr.nefu.edu.cn/CN/10.7525/j.issn.1673-5102.2007.05.013