%0 Journal Article %T 草鱼肝胰脏碱性磷酸酶的分离纯化及性质的研究 %A 伍红 %A 林亚秋 %A 沙亚娟 %A 王一帆 %A 薛福来 %A 贺庆华 %A 马金虎 %J 水产科学 %D 2014 %X 为获得草鱼肝胰脏的碱性磷酸酶,并阐明其性质,利用Tris-HCl(pH 7.5)缓冲液抽提、正丁醇脱脂、硫酸铵分级沉淀分离和葡聚糖凝胶(Sephadex G-150)等步骤对草鱼肝胰脏碱性磷酸酶进行分离纯化,测定碱性磷酸酶的动力学性质,研究金属离子对碱性磷酸酶活力的影响。试验结果表明,得到提取倍数为7.3倍、比活力为949.8 U/mg的碱性磷酸酶,酶液经SDS-PAGE呈一条带,其亚基的分子量约54 ku。动力学测定结果显示,该酶催化对硝基磷酸苯二钠水解反应的最适pH为10.33,最适温度为38℃,米氏常数为9.03 mmol/L ,最大反应速度为1.5μmol/(L · min)。Li+、Na+、K+对碱性磷酸酶活力影响不大;Ba2+、Ca2+、M g2+、M n2+能激活碱性磷酸酶活力;EDT A、Cu2+和Zn2+抑制碱性磷酸酶活力。研究结果可为碱性磷酸酶在鱼类脂质代谢中的作用提供参考和依据 %U http://www.shchkx.com/CN/abstract/abstract13174.shtml