%0 Journal Article
%T TLR4/NF-κB信号通路激活对大鼠海马神经元淀粉样β蛋白沉积的影响
%A 吴丹
%A 周爱玲
%A 张弦
%A 赵敏
%J 生理学报
%D 2015
%X 本文旨在探讨海马神经元Toll样受体4 (Toll-like receptor 4, TLR4)/核转录因子κB (nuclear factor κB, NF-κB)信号通路激活后对淀粉样β蛋白(β-amyloid, Aβ)沉积的影响。采用体外培养7 d的新生大鼠海马神经元，细胞免疫荧光双标法鉴定海马神经元的纯度。TLR4配体脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)、TLR4抑制剂CLI-095及NF-κB抑制剂PDTC分别预处理海马神经元，激活或阻断TLR4/NF-κB信号通路。酶联免疫吸附法测定海马神经元培养上清中肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素-1β (interleukin-1β, IL-1β)及Aβ1–42的水平；实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR, RT-qPCR)法检测海马神经元TNF-α、IL-1β、去整合金属蛋白酶10 (a disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 10, ADAM10)、β-分泌酶(β-site APP cleaving enzyme 1, BACE-1)、早老素-1 (Presenilin-1, PS-1)、β-淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein, β-APP) mRNA的表达；Western blot法检测海马神经元ADAM10、BACE-1、PS-1和β-APP蛋白的表达。RT-qPCR、Western blot法检测不同浓度Aβ1–42刺激海马神经元后TLR4 mRNA、蛋白的表达。结果显示，新生大鼠海马神经元无血清培养7 d后，其纯度可达95%以上。与正常对照组相比，LPS激活TLR4/NF-κB信号通路后，TNF-α、IL-1β、BACE-1、PS-1、β-APP、Aβ1–42的表达增加，相反，ADAM10的表达下降，而CLI-095或PDTC预处理则可以逆转这些改变。同时，给予不同浓度的Aβ1–42刺激海马神经元后，TLR4的表达明显上升。这表明海马神经元表面的TLR4/NF-κB信号通路被激活后，可以导致炎症因子水平的升高，进一步引起ADAM10水平的下降和BACE-1、PS-1水平的升高，最终导致β-APP、Aβ的沉积；而同时Aβ又能正反馈地引起海马神经元自身受体TLR4的升高，形成一个恶性循环。
%K 海马神经元
%K Toll样受体4
%K NF-κB
%K Aβ
%K 阿尔茨海默病
%K 炎症
%U http://www.actaps.com.cn/article.php?id=7375