%0 Journal Article
%T Rac1蛋白活化加速缺氧诱导的人血管内皮细胞衰老
%A 于海波
%A 孟子敏
%A 康建
%A 张效林
%A 李少华
%A 王士雯
%A 闫承慧
%A 韩雅玲
%J 生理学报
%D 2006
%X 为阐明Rac1蛋白在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)衰老中的作用及分子机制,作者采用持续缺氧的方法诱导内皮细胞衰老,检测缺氧前后内皮细胞衰老标志基因SA--#beta#--Gal和PAI--1的表达、细胞周期分布和细胞增殖情况,同时分析缺氧前后细胞内Rac1蛋白的表达。结果显示,持续缺氧96h后,HUVECs体积变大,细胞浆内颗粒和空泡增多,SA--#beta#--Gal活性明显增加,PAI--1基因表达升高,细胞发生G_(1)期阻滞,细胞增殖受抑,活化型Rac1蛋白表达上调,提示持续缺氧诱导的内皮细胞衰老可能与Rac1蛋白的活化有关。为进一步明确内皮细胞衰老与Rac1蛋白的关系,应用逆转录病毒将持续活化型Rac1(v12Rac1)和主导抑制型Rac1(N17Rac1)基因分别瞬时感染HUVECs,比较种HUVECs(HUVECs,V12Rac1--HUVECs,N17Rac1--HUVECs)缺氧后的衰老变化,并分析其下游调控分子-----血清反应因子(serum response factor,SRF)的表达和定位变化。研究发现,缺氧培养V12Rac1--HUVECs 48h即可引起细胞衰老，表现为SA--#beta#--Gal活性明显增加，PAI-1基因表达升高，细胞出现明显的G_(1)期阻滞并且细胞增殖受抑；其改变与缺氧96h的HUVECs相似；而N17Rac1明显抑制缺氧引起的内皮细胞衰老发生。上述结果说明Rac1蛋白活化可以加速缺氧诱导的内皮细胞衰老，而抑制Rac1蛋白的活性则可抑制缺氧诱导的内皮细胞衰老。为进一步研究Rac1蛋白引起内皮细胞衰老的机制，通过免疫荧光染色及Western blot分析检测三种细胞缺氧处理后SRF的表达发现：与HUVECs细胞比较，V12Rac1引起缺氧48h HUVECs 核蛋白中SRF的表达明显下降， SRF入核转位受到明显抑制；而N17Rac1感染后，缺氧HUVECs细胞核蛋白中SRF表达明显增多。上述结果提示：缺氧状态下Rac1蛋白活化能够明显加速HUVECs衰老，而抑制Rac1蛋白活性则明显抑制缺氧诱导的HUVECs衰老, SRF蛋白的核转位活化参与了Rac1蛋白调控HUVECs衰老的发生。
%K Racl
%K 缺氧
%K 内皮细胞
%K 衰老
%U http://www.actaps.com.cn/article.php?id=6859