%0 Journal Article
%T 线粒体ATP 敏感钾通道调控哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖
%A 叶永军
%A 周志刚
%A 胡伟华
%A 胡红玲
%A 赵建平
%A 高敏
%J 生理学报
%D 2009
%X 本文旨在探讨线粒体ATP 敏感钾(mitochondrial ATP-sensitive K+, MitoKATP)通道对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells, ASMCs)增殖的影响及其调控机制。36 只Sprague-Dawley (SD)大鼠随机分为哮喘组(n=18) 和正常组 (n=18)，哮喘组大鼠采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)致敏及激发的方法制备哮喘模型，正常组大鼠吸入等量生理盐水。取 各组大鼠肺组织，分离出ASMCs 进行培养，将样本分6 组分别进行干预：(1)正常组；(2)正常 + MitoKATP 通道开放剂 diazoxide 组(diazoxide 组)；(3)正常 + MitoKATP 通道阻断剂5-HD 组(5-HD 组)；(4)哮喘(asthma)组；(5) asthma + diazoxide 组； (6) asthma + 5-HD 组。利用罗丹明(Rhodamine123, R-123)荧光染色、激光共聚焦显微镜成像检测线粒体膜电位(ΔΨm)， DCFH-DA荧光染色法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量，RT-PCR 检测核因子κB (nuclear factor-κB, NF- κB) mRNA 的表达，流式细胞仪检测细胞凋亡和MTT 法检测细胞增殖情况。结果显示：(1) Diazoxide 组与正常组相比， R-123 荧光强度增强，ΔΨm 去极化，ROS 及NF-κB 的表达增高，细胞增殖增多、凋亡减少(P<0.05)；而5-HD 组与正常 组相比，上述指标均无显著差异；(2) 与正常组相比，Asthma 组R-123 荧光强度增强，ΔΨm 去极化，ROS 及NF-κB 的 表达增高，细胞增殖增多、凋亡减少(P<0.05)；Asthma + diazoxide 组与Asthma 组相比，R-123 荧光强度和ΔΨm 去极化 增强，ROS 及NF-κB 表达增高，细胞增殖增多、凋亡减少(P<0.05)；Asthma + 5-HD 组与Asthma 组相比，R-123 荧光 强度和ΔΨm 去极化减弱，ROS 及NF-κB 表达降低，细胞增殖减少、凋亡增多(P<0.05)；(3)各组大鼠ASMCs 的R-123 荧 光强度，NF-κB mRNA表达量与ROS 含量均呈正相关；MTT 的吸光度值与NF-κB mRNA表达量呈正相关，凋亡细胞百 分比与NF-κB mRNA表达量呈负相关。以上结果提示，哮喘可引起大鼠ASMCs 的MitoKATP 通道开放及ΔΨm 去极化，ΔΨm 去极化促进ROS 的表达，ROS 可能作为信号分子刺激NF-κB 表达增加，进而促进ASMCs 增殖，参与气道重构。
%K 哮喘
%K 线粒体膜电位
%K 线粒体ATP 敏感钾通道
%K 活性氧
%K 核因子κ B
%K 平滑肌
%U http://www.actaps.com.cn/article.php?id=7082