%0 Journal Article %T 小凹蛋白-1下调人脐静脉内皮细胞外钙敏感受体介导的钙内流 %A 何芳 %A 王振焕 %A 胡清华 %A 邓峰美 %A 钟华 %J 生理学报 %D 2011 %X 为了探讨小凹蛋白-1 (caveolin-1, Cav-1)在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)细胞外钙敏感受体(extracellular Ca2+-sensing receptor, CaR)介导Ca2+内流中的作用,本实验研究了细胞膜穴样凹陷(caveolae)结构破坏剂Filipin或Cav-1基因沉默后对CaR介导Ca2+内流的影响。Fura-2/AM负载检测细胞内Ca2+浓度(intracellular Ca2+ concentration, [Ca2+]i)。结果显示,HUVECs中CaR对不同浓度细胞外Ca2+刺激无反应。无论细胞外为零钙液或含钙液时,精胺(Spermine, 2 mmol/L)刺激CaR时均引起[Ca2+]i升高(P<0.05),其中细胞外液为含钙液时,[Ca2+]i升高较细胞外为零钙液时更明显(P<0.05),CaR的负性变构调节剂Calhex231 (1 μmol/L)均可完全阻断Spermine刺激引起的[Ca2+]i升高(P<0.05);相反,Spermine 升高[Ca2+]i作用可被Filipin (1.5 μg/mL)或Cav-1基因沉默进一步加强(均P<0.05)。免疫荧光技术检测显示HUVECs中有CaR和Cav-1表达,两者共定位于膜上。Western blot 检测结果显示Cav-1 干扰后,Cav-1蛋白表达降低,同时CaR的膜蛋白表达也降低(P<0.05),CaR的总蛋白表达无变化(P>0.05)。上述结果表明:Cav-1和CaR共定位于HUVECs膜,Cav-1对CaR介导的Ca2+内流有下调作用,其机制可能与Cav-1影响CaR膜定位及减弱其对激动剂反应性有关。 %K 小凹蛋白-1 %K 内皮细胞 %K 钙敏感受体 %K 钙信号 %U http://www.actaps.com.cn/article.php?id=7878