%0 Journal Article
%T 周期蛋白D1 参与香烟烟雾提取物促进人肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移
%A 刘先胜
%A 向敏
%A 徐永健
%A 曾大雄
%J 生理学报
%D 2010
%X 本文旨在探讨周期蛋白D1 (cyclin D1)在香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract, CSE)所致人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary artery smooth muscle cells, HPASMCs)增殖和迁移中的作用。构建反义cyclin D1 基因真核表达载体(pIRES2-EGFP-ascyclin D1)，采用脂质体介导基因转染法将空载体(pIRES2-EGFP)和pIRES2-EGFP-ascyclin D1 导入正常HPASMCs后，分别进行CSE 干预。细胞随机分为6 组：对照组、空载体组、反义cyclin D1 组、5% CSE 组、空载体+5% CSE组、反义cyclin D1+5% CSE 组。用实时荧光RT-PCR 和Western blot 法分别检测cyclin D1 mRNA 和蛋白的表达，采用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、增殖细胞核抗原(PCNA)染色法测定细胞增殖能力，Transwell 小室法检测细胞迁移能力。结果显示，反义cyclin D1 基因真核表达载体pIRES2-EGFP-ascyclin D1 成功构建，并成功转染入HPASMCs，转染后HPASMCs 中cyclin D1 的mRNA 和蛋白表达水平较对照组均显著下降(P<0.05)。与对照组比较，5% CSE 组cyclinD1 的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)，细胞增殖和迁移能力显著增强(P<0.05)。与5% CSE 组比较，反义cyclinD1+5% CSE 组cyclin D1 mRNA 和蛋白表达水平均明显下降(P<0.05)，细胞增殖和迁移能力显著降低(P<0.05)。上述结果提示，CSE 可通过上调cyclin D1 表达促进HPASMCs 增殖和迁移，反义cyclin D1 基因真核表达载体可抑制CSE 介导的HPASMCs 增殖和迁移，提示cyclin D1 在CSE 所致HPASMCs 增殖和迁移中发挥重要调控作用。
%K 香烟
%K 周期蛋白D 1
%K 肺动脉
%K 平滑肌细胞
%K 细胞增殖
%K 细胞迁移
%U http://www.actaps.com.cn/article.php?id=8080