%0 Journal Article %T 平面双分子层脂质膜上人工重建大电导钙激活钾通道 %A 文静 %A 曾晓荣 %A 李鹏云 %A 杨艳 %A 毛亮 %A 程俊 %A 谭晓秋 %J 生理学报 %D 2017 %X 本研究旨在探索建立一种稳定平面双分子层脂质膜(planar lipid bilayer membranes, PLBMs)的制备方法,并尝试将大电导钙激活钾通道(large conductance calcium-activated potassium channel, BKCa)蛋白融合其上进行单通道电流研究。将卵磷脂与胆固醇氯仿按3:1比例混合,用N2吹干氯仿,制成癸烷脂质液,采用涂抹法制备PLBMs,并将BKCa重建到PLBMs上,用膜片钳研究其单通道特性。结果显示,重建到PLBMs上的BKCa的单通道的电导值为(206.8 ±16.9) pS,当浴液中[Ca2+] = 0 μmol/L时,无论超极化或去极化状态下均很少见到BKCa的通道活动。膜电位为+40 mV时,当[Ca2+]由1 μmol/L增加到100 μmol/L时,通道开放概率由0.034 ± 0.002增加到0.961 ± 0.013,平均开放时间由(1.1 ± 0.2) ms延长到(151.3 ± 10.2) ms,平均关闭时间由(32.2 ± 2.8) ms缩短为(2.1 ± 1.8) ms;当K+浓度为40/140 mmol/L (Cis/Trans)时,重建的BKCa反转电位在?30 mV左右。以上结果提示:(1) 涂抹法可用于PLBMs的制备;(2) 重建后的BKCa通道具有电导值大、电压依赖性、Ca2+敏感性和K+选择性;(3) PLBMs技术可用于BKCa通道的药理学和动力学特性的研究。 %K 平面双分子层脂质膜 %K 涂抹法 %K 大电导钙激活钾通道 %U http://www.actaps.com.cn/article.php?id=7535