%0 Journal Article
%T 血管平滑肌细胞在不同细胞外基质的迁移特性: 玻片倒扣法研究
%A 王凤
%A 王桂芹
%A 薛峰
%A 陈兆琴
%A 黄智慧
%A 龚永生
%J 生理学报
%D 2013
%X 血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)迁移参与血管发育和多种疾病的发生、发展过程，然而其迁移机制尚不清楚。本课题建立了一种适合研究VSMCs迁移的方法——玻片倒扣法，基于该方法进一步研究VSMCs在不同细胞外基质上的迁移特性及机制。原代培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells, PASMCs)，采用免疫细胞化学方法鉴定其纯度。将细胞接种于小玻片上，待生长至单层汇合后，将小玻片倒扣于包被有不同细胞外基质的大玻片上，培养24 h后，固定、拍照、统计软件测量迁移出的细胞数量和迁移距离。进一步采用细胞划痕实验和免疫细胞化学技术，研究细胞外基质对PASMCs迁移的作用及机制。结果显示：(1)原代培养PASMCs纯度高达(97 ± 3)%；(2)玻片倒扣24 h后，层粘连蛋白(laminin)组、基质胶(Matrigel)组比对照(phosphate buffered saline, PBS)组、多聚右旋赖氨酸(poly-D-lysine hydrobromide, PDL)组迁出的细胞数量更多，迁移距离更远，差异具有明显统计学意义；(3)细胞划痕8、12、24 h后，细胞在层粘连蛋白、基质胶上的面积愈合率比在PBS上的高，差异具有统计学意义；(4)免疫细胞化学结果显示迁移能力较强的PASMCs中肌动蛋白在与细胞运动方向相一致的边缘聚集现象越明显；vinculin (粘附斑的标记物)染色显示，种植于层粘连蛋白和基质胶上的PASMCs中，vinculin的分布较PBS和PDL上的更少。上述结果表明：玻片倒扣法是一种适合研究VSMCs迁移的方法；层粘连蛋白和基质胶可能通过抑制粘附斑的形成和调节骨架蛋白，促进VSMCs迁移
%K 肺动脉平滑肌细胞
%K 细胞外基质
%K 迁移能力
%K 玻片倒扣
%U http://www.actaps.com.cn/article.php?id=7192