%0 Journal Article
%T 应用哺乳动物细胞表面抗体展示技术构建动脉粥样硬化抗体库
%A 周辉
%A 施黎银
%A 赵明
%J 中国病理生理杂志
%D 2019
%R 10.3969/j.issn.1000-4718.2019.12.004
%X 摘要 目的：利用哺乳动物细胞表面抗体展示技术构建动脉粥样硬化（As）抗体细胞库，以寻找动脉粥样硬化治疗性抗体。方法：将载体pcDNA5/FRT改造成双表达载体pcDNA-DHL。分离动脉粥样硬化患者外周血单个核细胞，提取总RNA，逆转录为cDNA。PCR扩增抗体重链可变区和Kappa型轻链全长，连接至双表达载体pcDNA-DHL，即动脉粥样硬化抗体基因库pDHL-As，将其转染Flp-InTM-CHO细胞（FCHO），流式细胞术检测重组抗体在细胞表面的表达。加入潮霉素筛选出成功转染pDHL-As载体的细胞，即为动脉粥样硬化全长抗体细胞库。结果：成功构建双表达载体pcDNA-DHL。构建的重、轻链初库容量分别达1.79×105和1.80×105，理论上抗体库多样性为2.32×1010。动脉粥样硬化抗体库pDHL-As可成功展示在细胞表面，并分选出45个表达抗氧化型低密度脂蛋白抗体的FCHO细胞。结论：本研究成功构建了一个动脉粥样硬化全长人源抗体细胞库。 服务 把本文推荐给朋友 加入我的书架 加入引用管理器 E-mail Alert RSS 作者相关文章 施黎银 周辉 赵明 服务 作者相关文章
%K 动脉粥样硬化^哺乳动物细胞表面展示^全长人源抗体库
%U http://www.cjpp.net/CN/abstract/abstract20760.shtml