%0 Journal Article
%T 虫草菌液通过增强自噬改善β-甘油磷酸诱导的血管平滑肌细胞钙化
%A 于艳秋
%A 姚丽
%A 徐天华
%A 田滨瑶
%A 盛子桐
%A 赵翡
%A 邱小波
%A 韩怡然
%J 中华肾脏病杂志
%D 2019
%R 10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2019.02.007
%X 摘要 目的 探讨冬虫夏草提取物虫草菌液（Cordyceps sinensis，CS）对高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化的影响机制。 方法 用细胞增殖与活性检测试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）检测CS对细胞生存活力的影响；用β-甘油磷酸（β-GP，10 mmol/L））建立大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）钙化模型，加入CS（10 mg/L）、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine，3-MA， 5 mmol/L）及一磷酸腺苷（AMP）活化的蛋白激酶（AMPK）抑制剂化合物C（CC，10 μmol/L）进行干预，实验分为5组：对照组（Ctrl）、β-GP组、β-GP+CS组、3-MA+β-GP+CS组、CC+β-GP+CS组。通过茜素红S染色及钙测定试剂盒检测各组细胞钙沉积量；透射电镜观察VSMC内自噬体的形成；免疫荧光检测细胞质内微管相关蛋白1轻链3（LC3）的表达；Western印迹法检测血管平滑肌标志物α-SMA蛋白、成骨指标Runx2、自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1及AMPK/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路蛋白。 结果 虫草菌液能使高磷环境中血管平滑肌细胞的自噬体、LC3荧光点状聚集及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、α-SMA、磷酸化（p）-AMPK蛋白表达增多，Runx2、p-mTOR蛋白表达及钙沉积减少（均P＜0.01）。用3-MA抑制自噬后，β-GP+CS环境中的血管平滑肌细胞 α-SMA蛋白表达减少（P＜0.01），Runx2蛋白表达及钙沉积增多（均P＜0.01），提示虫草菌液是通过激活自噬减轻了β-GP诱导的血管平滑肌细胞的钙化。用CC抑制AMPK/mTOR信号通路后，β-GP+CS组的血管平滑肌细胞的p-AMPK蛋白表达明显减少（P＜0.01）， 且LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、α-SMA蛋白表达量及自噬体、LC3荧光点状聚集也减少，p-mTOR、Runx2蛋白表达量及钙沉积增多（均P＜0.01），提示虫草菌液是通过激活依赖AMPK/mTOR信号通路的自噬而减轻了β-GP诱导的血管平滑肌细胞的钙化。 结论 虫草菌液能有效减轻高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化，其机制可能是通过激活AMPK/mTOR信号通路增强自噬。 服务 把本文推荐给朋友 加入我的书架 加入引用管理器 E-mail Alert RSS 作者相关文章 邱小波 盛子桐 韩怡然 徐天华 田滨瑶 赵翡 于艳秋 姚丽 服务 作者相关文章
%K 冬虫夏草
%K ^自噬
%K ^肌^平滑^血管
%K ^磷
%K ^肾功能不全^慢性
%K ^钙化
%U http://www.cjn.org.cn/CN/abstract/abstract3132.shtml