%0 Journal Article
%T 体外心肌毒性代谢组学样品预处理及UPLC/Q-TOF-MS条件优化
%A 刘昌孝
%A 张兴
%A 张宗鹏
%A 李黎
%A 申秀萍
%A 钱鑫
%J 药物评价研究
%D 2016
%R 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.04.010
%X 目的 筛选最佳的体外原代心肌（PC）细胞代谢组学样品预处理方法，对超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术（UPLC/Q-TOF-MS）的色谱-质谱条件优化，为建立体外心肌毒性代谢组学研究方法奠定基础。方法 利用UPLC/Q-TOF-MS技术，分别考察0.05%胰酶消化后冰甲醇提取和刮刀刮取后6种不同溶剂提取的心肌细胞样品预处理方法，考察5种流动相梯度洗脱方案和正、负离子检测模式下的基峰离子流图，利用质量控制样本（QC）进行仪器精密度、方法精密度和样本稳定性试验等方法学考察。结果 最佳的心肌细胞样品预处理方法为：0.05%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化后-80℃甲醇直接提取。最佳的流动相洗脱程序为：0 min，2.0% A；2 min，25.0% A；6 min，40.0% A；12 min，90.0% A；保持2 min；16 min，2.0% A；保持2 min。最佳的质谱检测模式为：正离子模式。本方法的仪器精密度、方法精密度和样本稳定性试验以相对峰面积比值的RSD计分别为4.9%～14.9%、8.6%～17.8%和5.2%～16.3%，以保留时间的RSD计均<1.0%，符合检测要求。结论 确定了最佳的心肌细胞样品预处理方法及UPLC/Q-TOF-MS分析条件，为建立和完善体外心肌毒性代谢组学研究提供参考依据
%K 体外心肌毒性
%K 代谢组学
%K 样品预处理
%K 超高效液相色谱-飞行时间质谱
%K 条件优化
%U http://www.tiprpress.com/ywpjyj/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20160410&flag=1