%0 Journal Article %T CCK-8法检测小鼠淋巴细胞增殖的条件探讨 %A 梁金强 %A 王园园 %A 胡明华 %A 谭小燕 %A 马方励 %A 黄芝瑛 %J 药物评价研究 %D 2017 %R 10.7501/j.issn.1674-6376.2017.02.012 %X 目的 探索CCK-8法检测小鼠脾淋巴细胞增殖的最佳条件。方法 采用交叉设计或两因素完全随机设计探索分裂素刀豆蛋白(ConA)或脂多糖(LPS)刺激的脾细胞增殖实验的细胞制备方法、细胞浓度、分裂素浓度、刺激时间、培养基中胎牛血清(FBS)浓度、是否预培养等条件。结果 制备方法中以轻压制备的脾细胞增殖率高于轻磨;脾细胞浓度以5×106/mL为最佳;ConA浓度为2、5、10 μg/mL,LPS浓度为10、20、50 μg/mL细胞增殖率未见明显差异;刺激时间在48和72 h间脾细胞增殖率未见明显差异;用含10%、15%和20% FBS的培养基培养的脾细胞增殖率未见明显差异;制备的脾细胞当天刺激比第二天刺激增殖率更高。结论 ConA和LPS刺激的Balb/C小鼠脾细胞增殖实验的最佳条件为,轻压制备脾细胞,脾细胞浓度为5×106/mL,制备当天直接种板,ConA的刺激浓度为2~10 μg/mL,LPS的刺激浓度为10~50 μg/mL %K CCK-8 %K 淋巴细胞增殖 %K 脾细胞制备 %K 刀豆蛋白 %K 脂多糖 %U http://www.tiprpress.com/ywpjyj/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20170212&flag=1