%0 Journal Article
%T 桂郁金多糖对H2O2致人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及机制
%A 俞献文
%A 冯柏林
%A 唐丽清
%A 杨秀芬
%A 覃琴
%J 中国实验方剂学杂志
%D 2018
%R 10.13422/j.cnki.syfjx.20182333
%X 目的：通过体外实验研究不同质量浓度桂郁金多糖对过氧化氢（H2O2）致人脐静脉内皮细胞损伤的的保护作用及机制。方法：对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）进行体外培养，用不同浓度H2O2损伤HUVECs，采用细胞增殖/毒性检测试剂盒（CCK-8），确定H2O2最佳损伤浓度为500 μmol·L-1。然后给予不同浓度的桂郁金多糖对损伤的HUVECs进行保护，用CCK-8，确定62.5，125，250 mg·L-1作为桂郁金多糖的低、中、高质量浓度组。采用CCK-8法检测桂郁金多糖对H2O2损伤HUVECs细胞活力的影响；采用试剂盒测定乳酸脱氢酶（LDH），超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px），丙二醛（MDA）；通过酶联免疫吸附测定（ELISA）检测细胞中肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白细胞介素-6（IL-6）的含量表达。采用Hoechst 33258荧光染色法对细胞凋亡情况进行观察；并采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定细胞中B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2），Bcl-2相关X蛋白（Bax），半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）mRNA的表达情况。结果： CCK-8检测结果表明，给药时间24 h后，桂郁金多糖在15.625~500 mg·L-1，能够促进细胞增殖，而浓度增大后，桂郁金多糖则对细胞有一定的抑制作用。与模型组比较，桂郁金多糖能够使LDH，MDA，IL-6，TNF-α水平明显减少（P<0.05，P<0.01），使SOD和GSH-Px的含量明显增加（P<0.05，P<0.01）。Hoechst 33258荧光染色结果表明，与空白组比较，模型组HUVECs细胞核呈亮蓝色荧光，细胞质内可见浓染致密的颗粒块状荧光，细胞密度降低；与模型组比较，桂郁金多糖给药组的蓝色荧光强度降低，细胞凋亡典型形态减少。Real-time PCR实验结果显示，与空白组比较，模型组减少Bcl-2 mRNA的表达，增加Bax，Caspase-3 mRNA的表达（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，桂郁金多糖给药组能够增加Bcl-2 mRNA的表达（P<0.05，P<0.01），减少Bax，Caspase-3 mRNA的表达（P<0.05，P<0.01）。结论：桂郁金多糖通过抗氧化和抑制细胞凋亡等途径对H2O2损伤的人脐静脉内皮细胞进行保护
%K 桂郁金多糖 损伤 人脐静脉内皮细胞 保护 作用机制
%U http://www.syfjxzz.com/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20182322&flag=1