%0 Journal Article
%T 从肺癌组织提取高纯度总RNA方法的优化及应用
%A 王增
%A 程斌
%A 钟里科
%A 陈枢青
%A 黄萍
%J 中国现代应用药学报
%D 2016
%X 目的 通过对传统TRIzol提取组织中RNA的方法进行优化，建立一种较为简便、高效、经济的提取方法，并用优化后的方法检测非小细胞肺癌组织中ERCC1、RRM1和BRCA1的mRNA表达水平。方法 非小细胞肺癌的组织标本(包括肿瘤组织和正常组织)36例，采用传统和优化后的方法提取肺癌组织及正常组织中RNA，以SYBR Green荧光实时定量PCR分析各组织中ERCC1、RRM1、BRCA1以及管家基因GAPDH的mRNA表达水平。结果 传统方法的RNA浓度和纯度分别为(0.76±0.07)mg?mL-1和1.87±0.04，优化方法的RNA浓度和纯度分别为(1.12±0.07)mg?mL-1和1.95±0.03；琼脂糖凝胶电泳表明RNA没有降解，各个引物的熔解曲线均呈单峰，特异性良好。实时荧光定量显示，肺癌组织中ERCC1、RRM1和BRCA1的相对mRNA表达高于正常组织；ERCC1和BRCA1在不同病理类型(腺癌、鳞癌)的肿瘤组织中表达无显著性差异，RRM1在肺鳞癌中的表达显著高于腺癌(P<0.05)；不同性别中的基因表达均无显著性差异。结论 相比传统方法，利用优化后的方法提取样本的总RNA浓度、纯度和完整性均显著提高，能满足各种基因表达和定量检测实验的需要。非小细胞肺癌中ERCC1、RRM1和BRCA1的表达水平与肿瘤增殖活性密切相关，与临床肿瘤的病理类型也有一定的相关性
%K 肿瘤组织
%K 非小细胞肺癌
%K RNA提取
%K TRIzol法
%K 实时荧光定量PCR
%U http://www.chinjmap.com/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=252118&flag=1