%0 Journal Article %T 巴什拜羊BPI基因的克隆与真核表达 %A 陈冬梅 %A 沈文 %A 刘恺 %A 郭海英 %A 陈凯丽 %A 孙延鸣 %J 江苏农业科学 %D 2015 %X 从巴什拜羊外周血多形核粒细胞(PMN)中提取总RNA,经RT-PCR扩增出巴什拜羊BPI基因片段,将其克隆至pPIC9K载体中,构建真核表达质粒pPIC9K-BPI,经PCR、酶切及测序鉴定正确后,电转化至毕赤酵母GS115中并用甲醇诱导表达,SDS-PAGE鉴定重组BPI蛋白的表达,通过微量肉汤稀释法检测重组BPI蛋白的抑菌活性。结果表明:RT-PCR扩增获得597 bp巴什拜羊BPI基因;经PCR、酶切及测序鉴定证实成功构建BPI基因的真核表达载体,SDS-PAGE检测结果表明,重组BPI蛋白成功表达,通过抑菌试验表明表达的重组BPI蛋白具有明显抑菌活性 %K 巴什拜羊 %K 杀菌性 %K 通透性增加蛋白 %K 毕赤酵母 %K 基因克隆 %K 真核表达 %U http://www.jsnykx.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201509010