%0 Journal Article %T 额外的错配碱基提高T4 DNA连接酶等位特异性连接 %A 李书亚 %A 胡亚赛 %A 郜艳敏 %A 郝敏 %A 齐浩 %J 中国生物化学与分子生物学报 %D 2018 %R 10.13865/j.cnki.cjbmb.2018.08.08 %X 连接是一种主要的DNA处理过程。由于较低的商业成本以及核酸底物识别的灵活性,T4 DNA连接酶被广泛应用于生物分子工程,特别是特定核酸序列的等位特异性连接检测。本文评估了在T4 DNA连接酶介导的连接反应中,引入额外的错配碱基对所产生的影响。设计了超过150组DNA/DNA或DNA/RNA带有的额外错配碱基对的组合。结果发现,引入额外的错配碱基对后,T4 DNA 连接酶在DNA/DNA连接中特异性可提高60倍以上,而在DNA/RNA连接中特异性只能提高2倍。在等位特异性连接中,有的错配碱基对可使T4 DNA连接酶的特异性提高600多倍 %K 等位特异性连接 %K 错配 %K T4 DNA连接酶 %K 锁式探针 %U http://cjbmb.bjmu.edu.cn/CN/abstract/abstract24400.shtml