%0 Journal Article
%T 应用荧光原位杂交技术检测康柏西普基因在CHO细胞染色体上的整合状态
%A 师明磊
%A 易天红
%A 柯潇
%A 赖维莉
%A 赵志虎
%J 遗传
%D 2017
%R 10.16288/j.yczz.16-335
%X 摘要: CHO细胞是常用的哺乳动物表达工程细胞。外源基因整合至CHO细胞染色体后,在大规模蛋白质生产过程中,由于相关压力撤除,外源基因存在丢失的可能,因此有必要对其整合稳定性进行检测。康柏西普(conbercept)是一个能够特异性结合VEGF-A的各种异构体、VEGF-B以及PlGF,从而发挥抗血管生成活性的融合蛋白。康柏西普目前已在美国进入Ⅲ期临床试验。本文运用荧光原位杂交对康柏西普基因在CHO细胞的整合状态进行了检测,发现经过4和19次传代后,康柏西普基因依然能稳定整合在基因组上,并且呈现出3个特点：(1)分布在一条染色体上,而不是多条染色体上;(2)分布在较长的染色体上;(3)在同一染色体上有较多拷贝数。同时,荧光定量PCR结果证明基因拷贝数无明显改变,ELISA检测证明蛋白表达水平亦无明显改变。上述实验证明在经过19次传代以后,康柏西普基因仍然稳定整合在基因组中,并可活跃表达,为康柏西普大规模生产及产品质控提供了有力依据
%K 荧光原位杂交
%K 康柏西普
%K CHO工程细胞
%K 基因组整合
%U http://www.chinagene.cn/CN/10.16288/j.yczz.16-335