%0 Journal Article
%T sgRNAcas9软件图形用户界面开发及应用
%A 任瑞敏
%A 倪攀
%A 张懿
%A 李京津
%A 李广磊
%A 谢胜松
%A 赵书红
%A 陈济良
%A 赵长志
%J 遗传
%D 2015
%R 10.16288/j.yczz.15-292
%X 摘要: CRISPR/Cas9系统介导的基因组编辑技术是新一代功能强大的基因修饰技术。然而,脱靶效应(Off-target effects)是目前CRISPR/Cas9技术面临的最大问题。因此,设计脱靶风险低的sgRNA(single guide RNA)就成为关键。sgRNAcas9是一款专门用于sgRNA设计和评估脱靶效应的软件包。针对其核心运行程序,我们利用Java程序语言开发了其图形用户界面。此外,依据脱靶位点碱基数和sgRNA种子序列(seed sequences)的特异性,通过设置不同的风险等级对sgRNA的脱靶效应进行评估。随后,利用此软件设计了34 124条靶向人、小鼠、大鼠、猪和鸡中共4691个microRNA(miRNA)前体的sgRNAs。此外,随机挑选了一个靶向人miR-206前体的sgRNA进行脱靶效应评估和验证。结果发现,sgRNAcas9软件人机交互界面友好,大多数miRNA前体可通过该软件寻找到sgRNA,且他们的GC%含量范围集中于40%~60%。利用sgRNAcas9软件设计的靶向miR-206的sgRNA,其基因组编辑活性和脱靶位点可被实验验证。本研究表明sgRNAcas9图形用户界面软件能针对任意物种设计特异性的sgRNA,其可在BiooTools(http://www.biootools.com/)网站下载
%K CRISPR/Cas9
%K sgRNAcas9软件
%K 基因组编辑
%K miRNA
%K 计算机辅助设计
%U http://www.chinagene.cn/CN/10.16288/j.yczz.15-292