%0 Journal Article
%T 重组杆状病毒表达Sf-caspase-1双链RNA对昆虫细胞凋亡的影响
%J 西北农林科技大学学报(自然科学版)
%D 2016
%X 【目的】构建包含Sf-caspase-1反向重复序列的重组杆状病毒vAcMNPV-dsCasp，并在草地贪夜蛾(Sf9)细胞中表达Sf-caspase-1双链RNA，用以抑制Sf9细胞的凋亡，为未来优化杆状病毒表达系统提供试验依据。【方法】将Sf-caspase-1反向重复序列构建到pBac5上，与AcMNPV Bacmid共转染Sf9细胞产生重组杆状病毒，用RT-PCR和PI活细胞染色方法，分别检测Sf-caspase-1 mRNA含量及Sf9细胞的凋亡情况。【结果】PCR和双酶切检测结果表明，成功构建了重组质粒pBac5-dsCasp，并得到重组杆状病毒vAcMNPV-dsCasp。PI染色结果表明，相比野生型病毒vAcMNPV,重组杆状病毒vAcMNPV-dsCasp能够抑制Sf9细胞的凋亡。RT-PCR结果表明，vAcMNPV-dsCasp感染的Sf9细胞中Sf-caspase-1 mRNA含量明显下降。【结论】在重组杆状病毒上表达Sf-caspase-1双链RNA确实能够沉默Sf-caspase-1，从而抑制细胞凋亡
%K vAcMNPV RNAi dsRNA Sf-caspase-1 细胞凋亡 杆状病毒表达系统
%U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20161127&flag=1