%0 Journal Article
%T 抗鸭坦布苏病毒NS5蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
%J 西北农林科技大学学报(自然科学版)
%D 2016
%X 【目的】制备抗鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu virus,DTMUV）NS5蛋白的单克隆抗体。【方法】将实验室保存的PET28a-NS5载体转化入Rosetta(DE3)感受态细胞中进行诱导表达，利用纯化的鸭坦布苏病毒NS5蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠，应用淋巴瘤细胞杂交技术结合有限稀释法制备单抗，并对单抗的特异性、反应性及其抗原表位和亚类进行鉴定。【结果】筛选获得2株稳定分泌针对DTMUV 的NS5蛋白单抗的杂交瘤细胞，分别命名为A4D1和B4B8。此2株杂交瘤细胞诱导BALB/c小鼠的抗体效价均可达到1∶64 000。间接ELISA、Western blot和间接免疫荧光（IFA）检测结果表明，所获细胞分泌的抗体能与DTMUV及纯化的NS5蛋白发生特异性反应。经鉴定2株单抗的亚类均为IgG1型，通过叠加ELISA方法，初步判定2株单抗识别不同的抗原表位。【结论】成功获得了抗鸭坦布苏病毒NS5蛋白的单克隆抗体,为研究NS5蛋白的功能奠定了基础
%K 鸭坦布苏病毒 NS5蛋白 单克隆抗体
%U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20161001&flag=1