%0 Journal Article
%T 肿瘤坏死因子-α 可诱导 GSTM5 核转位
%A 李理
%A 袁伟锋
%A 郭振辉
%A 黄文杰
%J -
%D 2017
%R doi:10.7507/1671-6205.201611031
%X 目的构建稳定表达谷胱甘肽 S 转移酶 mu5（GSTM5）的人支气管上皮 16HBE 细胞株，探讨诱导 GSTM5 核转位的关键因素。 方法构建表达 GSTM5 基因的重组慢病毒载体（PLVX-puro-GSTM5-SBP-3*flag-N、PLVX-puro-3*flag-SBP-GSTM5-C）并制备出相应的慢病毒，感染人支气管上皮 16HBE 细胞后，经嘌呤霉素筛选获得细胞克隆；实时荧光定量 PCR 和蛋白印迹法（Western blot）分别检测细胞株中 GSTM5 的 mRNA、蛋白表达水平；以肿瘤坏死因子-α（TNF-α；10 ng/ml）刺激稳定转染细胞株（稳转株） 0.5 h，共聚焦荧光显微镜检测 GSTM5 核转位。 结果成功构建稳定表达 GSTM5 人支气管上皮细胞株（16HBE-GSTM5-SBP-3*flag-N、16HBE-3*flag-SBP-GSTM5-C）；荧光共聚焦显微镜显示稳转株在 TNF-α 刺激诱导后，GSTM5 由胞浆转入胞核，以 16HBE-GSTM5-SBP-3*flag-N 稳转株更显著。 结论TNF-α 刺激可诱导 GSTM5 人支气管上皮细胞株中 GSTM5 发生核转位，可能与其 N 端含有非经典核定位信号密切相关
%K 谷胱甘肽 S 转移酶 mu 5
%K 重组慢病毒表达质粒
%K 16HBE
%K 核转位
%K 肿瘤坏死因子-α
%U http://www.cjrccm.com:80/article/10.7507/1671-6205.201611031