%0 Journal Article %T PMA-实时荧光PCR快速检测蔬果中金黄色葡萄球菌活菌<br>Rapid detection of viable Staphylococcus aureus in vegetables and fruits using PMA-real time PCR %A 於颖 %A 王文静 %A 陆晔 %A 张曦 %A 张红芝 %A 顾其芳 %A 陈敏 %J 现代预防医学 %D 2016 %X 目的 将叠氮溴化丙锭(PMA)与实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术相结合,快速检测蔬果中金黄色葡萄球菌活菌。方法 通过对影响PMA作用的关键因素,包括PMA浓度、光照时间以及活、死菌比例混合等进行试验,确定PMA的作用条件。以金黄色葡萄球菌nuc基因为靶基因,建立PMA-实时荧光定量PCR方法,并构建金黄色葡萄球菌重组质粒标准品,用于检测蔬果中金黄色葡萄球菌活菌。结果 在PMA 30 μg/ml浓度下,曝光5 min,可实现PMA筛选金黄色葡萄球菌活菌的作用。由构建的质粒标准品模板建立标准曲线表现出良好线性关系,相关系数r = 0.9995,所建立的方法灵敏度可达到14 copies /μl,且特异性良好。经2 h增菌后用PMA进行筛选,再用荧光定量PCR检测,可实现快速对蔬果样品中活的金黄色葡萄球菌的检测。结论 用PMA-实时荧光定量PCR方法可快速检测蔬果中活的金黄色葡萄球菌,可为食品安全风险监测提供可靠数据。<br> %K 叠氮溴化丙啶 %K 荧光定量PCR %K 金黄色葡萄球菌 %K 活菌 %K 蔬果< %K br> %U http://xdyfyxzz.paperopen.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=20162029