%0 Journal Article
%T 实时荧光定量PCR和PFGE在检测海产品中副溶血性弧菌的应用<br>Application of RT-PCR and PFGE methods for detection of vibrio parahaemolyticus in seafood
%A 严寒秋
%A 李姗姗
%A 黄瑛
%A 曲梅
%A 张新
%A 吕冰
%A 陈丽娟
%A 王全意
%J 现代预防医学
%D 2016
%X 目的 应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)筛检海产品中副溶血性弧菌,结合常规培养以提高检出率;应用PFGE对32株副溶血性弧菌进行分子分型分析。方法 在常规培养的基础上,应用RT-PCR对96件样品增菌液进行初筛,再用常规培养法确证阳性;用阳性似然比与阴性似然比、符合率与Kappa值做为指标,评价RT-PCR筛检的真实性和可靠性;用限制性内切酶 SfiⅠ对32株菌进行PFGE分子分型,用BioNumerics Version 5.01软件对图像进行聚类分析。结果 96件样品常规培养法检出率24.00%,RT-PCR/常规培养法检出率33.33%。阳性似然比为3.88,阴性似然比为0.06。符合率为80.21%,中、高度一致(Kappa值=0.57);32株菌得到31个PFGE图谱类别,相似性在62.1%~100.0%之间,可分5个聚类群。结论 RT-PCR在检测海产品中副溶血性弧菌有很好的初筛作用,RT-PCR /常规培养法使用价值高;海产品中副溶血性弧菌亲缘关系较远,显示高度多态性。<br>
%K 实时荧光定量PCR
%K PFGE
%K 海产品
%K 副溶血性弧菌&lt
%K br&gt
%U http://xdyfyxzz.paperopen.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=20161732