%0 Journal Article
%T Nrf2基因沉默的人支气管上皮细胞模型的建立<br>Establishment and identification of silence BEAS-2B cells model of Nrf2 genes expression by RNA interference
%A 倪静
%A 申培
%A 吴拥军
%A 玉崧成
%A 冯斐斐
%J 现代预防医学
%D 2017
%X 目的 构建沉默Nrf2(Nuclear Factor-erythroid 2-related Factor 2,Nrf2)基因表达的RNA干扰质粒,建立稳定转染Nrf2干扰质粒的人支气管上皮细胞株BEAS-2B (Human Bronchial Cells),并对其在该细胞中的沉默效果进行鉴定。方法 根据 Genbank 上公布的人 Nrf2核苷酸序列设计4条RNA抑制靶序列。化学合成后载入PGU6/RFP/Neo质粒载体构建成短发夹RNA(shRNA)表达载体,分别转染至BEAS-2B细胞,G418筛选稳定转染细胞株,RT-PCR(Real time-RCR)检测目标基因Nrf2的表达水平。结果 成功构建shRNA质粒表达载体,G418浓度为400mg/L时能够筛选到稳定转染的细胞株,构建的稳定细胞系均能特异性的抑制Nrf2基因的表达。结论 通过RNA干扰(RNA Interfering,RNAi)技术能够成功构建BEAS-2B细胞Nrf2下调表达的细胞模型,为研究Nrf2在肺癌抗氧化通路中的作用机制奠定了基础。<br>
%K RNA干扰
%K Nrf2基因
%K 细胞模型&lt
%K br&gt
%U http://xdyfyxzz.paperopen.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=20171528