%0 Journal Article
%T 重组毕赤酵母植酸酶N-糖基化位点质谱鉴定<br>Identification of N-glycosylation sites of recombinant phytases from Pichia pastoris by mass spectrometry
%A 张　琪
%A 吴秀菊
%A 俞　婷
%A 王志林
%A 崔百元
%A 朱庆锋
%A 贝锦龙&lt
%A br&gt
%A ZHANG Qi
%A WU Xiuju
%A YU Ting
%A WANG Zhilin
%A CUI Baiyuan
%A ZHU Qingfeng
%A BEI Jinlong
%J 华中师范大学学报（自然科学版）
%D 2018
%X 为系统评估重组毕赤酵母植酸酶的N-糖基化充分性，建立了一种通过联用高效液相色谱-串级质谱来分析植酸酶氨基酸序列及N-糖基化位点的技术.分别发酵了3株基因组已整合不同植酸酶基因的毕赤酵母.发酵液上清经离子交换与凝胶过滤后获得纯化的植酸酶.使用PNGase F或Endo H脱糖基化酶处理植酸酶后，用胰蛋白酶消化脱糖基化产物.通过纳升级高效液相色谱分离胰蛋白酶切产生的肽段混合物.并在联用的串级质谱上进行肽段测序与N-糖基化位点鉴定.结果显示3种植酸酶蛋白的可检测序列覆盖率均在69%以上，且与文献报道不同，均存在糖基化位点修饰不充分的现象.本实验结果证明了高效液相色谱-串级质谱联用法检测植酸酶N-糖基化位点的有效性，并为植酸酶的糖基化研究提供了新的基础.<br
%K 植酸酶
%K N-糖基化
%K 质谱
%K 毕赤酵母
%K &lt
%K br&gt
%K phytase
%K N-linked glycosylation
%K mass spectrometry
%K Pichia pastoris
%U http://journal.ccnu.edu.cn/zk/CN/abstract/abstract8136.shtml