%0 Journal Article %T 翘嘴鳜铜锌超氧化物歧化酶基因的分子克隆与原核表达<br> %A 程周玉 %A 许亮清 %A 胡向萍 %A 胡宝庆 %A 简少卿 %A 阳刚 %A 张明 %A 文春根 %A 宁瑞红 %A 王鹤< %A br> %A CHEN Zhouyu %A XU Liangqing %A HU Xiangping %A HU Baoqing %A JIAN Shaoqing %A YANG Gang %A ZHANG Ming %A WEN Chungen %A NING Ruihong %A WANG He %J 福州大学学报(自然科学版) %D 2015 %X 运用RT-PCR和RACE-PCR技术克隆了翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)铜锌超氧化物歧化酶(命名为ScCu/Zn-SOD)基因,该基因的cDNA序列全长为804bp,开放阅读框为465bp,编码154个氨基酸。氨基酸序列中含2个Cu/Zn-SOD标签序列、7个铜锌金属结合位点、2个半胱氨酸位点和1个N-糖基化位点;其与胞内Cu/Zn-SOD(icCu/Zn-SOD)和胞外Cu/Zn-SOD(ecCu/Zn-SOD)氨基酸序列的同源性分别为60.13%~92.21%和33.77%~42.21%。在系统进化树中,ScCu/Zn-SOD与其它物种的icCu/Zn-SOD聚成一支。ScCu/Zn-SOD的蛋白晶体结构主要由2个α螺旋和8个β折叠组成,呈β折叠构象,通过结合1个Cu2+和1个Zn2+构成其酶活性中心。ScCu/Zn-SOD的mRNA在翘嘴鳜肌肉、鳃、肝脏和肾脏等组织中均有表达,且鳃中的相对表达量最高。将该基因编码蛋白序列与pET-30a表达载体重组,热激转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达,SDS-PAGE检测发现诱导后菌液的超声上清中有可溶性重组蛋白表达。<br %K 翘嘴鳜 %K 超氧化物歧化酶 %K 基因克隆 %K 原核表达 %K < %K br> %U http://qks.ncu.edu.cn/Jwk_xblxb/CN/abstract/abstract35857.shtml