%0 Journal Article %T 细胞穿透肽CCL融合蛋白的构建与表达 %A 刘勇, %A 吴君 %A 安艳芳 %A 杨建业 %A 王仲霞 %J 中国感染控制杂志 %D 2016 %R 10.3969/j.issn.1671-9638.2016.06.001 %X 目的评估细胞穿透肽CCL融合蛋白构建的可能性。方法将CCL6PEP6XHis构建至pABP质粒,然后提取pABPCCL6PEP质粒进行人胚肾HEK293细胞转染表达,以及CCL6PEP6XHis 蛋白层析纯化和检测。结果成功构建并纯化细胞穿透肽CCL融合蛋白。将CCL6PEP6XHis Tag 基因经PCR扩增、接入T 载体、克隆、培养,并提取质粒进行测序鉴定,所得序列与目的基因一致。成功将CCL6PEP6XHis基因构建至哺乳动物细胞表达载体pABP 中,经质粒提取和酶切鉴定,电泳结果显示,HindⅢ + XbaⅠ切出约430 bp的条带,符合预期,酶切鉴定正确。蛋白质印迹法(Western Blot)检测结果阳性,表明纯化得到的目标蛋白带有hisx6标签。结论细胞穿透肽CCL融合蛋白能够人工构建,并通过真核细胞进行表达 %K 细胞穿透肽 %K CCL %K 基因表达 %K 重组融合蛋白质 %U http://www.zggrkz.com/CN/abstract/abstract9726.shtml