%0 Journal Article %T 瞬时感受器电位通道 vanilloid 4 在机械牵张人脑微血管内皮细胞中对内皮型一氧化氮合酶的作用<br>Role of TRPV4 channels in regulation of eNOS expression in brain microvascular endothelial cells under the condition of mechanical stretch %A 蒲九君 %A 王志明 %A 周辉 %A 钟艾凌 %A 阮伦亮 %A 靳凯 %A 杨刚< %A br> %A PU Jiujun %A WANG Zhiming %A ZHOU Hui %A ZHONG Ailing %A RUAN Lunliang %A JIN Kai %A YANG Gang %J 中南大学学报(医学版) %D 2015 %R 10.11817/j.issn.1672-7347.2015.09.003 %X 目的:筛选人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)中瞬时感受器电位 (transient receptor potential,TRP)通道亚型,检测该通道亚型在机械牵张刺激中对内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达的影响及探讨相关机制。方法:荧光定量RT-PCR (qRT-PCR)、Western印迹及细胞免疫 荧光筛选HBMEC上TRP通道亚型。根据筛选的TRP通道亚型将细胞分组,应用多功能小型生物撞击机给予机械牵张 刺激;流式细胞仪检测细胞牵张前后胞内Ca2+荧光强度变化;Western印迹检测eNOS蛋白表达情况。结果:qRT-PCR 结果表明:TRPV4及TRPC1的mRNA相对表达量较多;细胞免疫荧光及Western印迹显示TRPV4通道蛋白表达;流式细 胞仪检测结果显示,特异性TRPV4通道抑制组较单纯牵张组Ca2+相对浓度低(P<0.001),较未牵张组(P=0.072)、非特异 性TRP通道抑制组(P=0.308)无明显差异。Western印迹检测结果显示:TRPV4通道抑制组和内皮型一氧化氮合酶抑制 组eNOS蛋白表达水平较单纯牵张组明显降低(P<0.05),较未牵张组无明显差异(P>0.05)。结论:TRPV4在HBMEC上有 表达,机械牵张将其激活后,可以引起eNOS蛋白表达增多,其机制可能与胞外Ca2+的内流有关 %K TRPV4 %K 机械牵张刺激 %K 内皮型一氧化氮合酶 %K < %K br> %K transient receptor potential vanilloid 4 %K mechanical stretch %K endothelial nitric oxide synthase %U http://xbyxb.csu.edu.cn/xbwk/CN/abstract/abstract3501.shtml