%0 Journal Article %T 翼螺旋转录因子FOXO1的DNA结合域的表达、纯化及结合特性<br>Expression and purification of FOXO1 DNA binding domain and its DNA properties %A 哈依努尔 %A %A 李俊 %A 陈永恒 %A 陈林 %A %A 陈主初< %A br> %A HA Yinuer %A %A LI Jun %A CHEN Yongheng %A CHEN Lin %A %A CHEN Zhuchu %J 中南大学学报(医学版) %D 2017 %R 10.11817/j.issn.1672-7347.2017.01.001 %X 目的:探讨翼螺旋转录因子FOXO1的DNA结合域(FOXO1 DNA binding domain,FOXO1-DBD)的表达、纯化及与DNA的结合特性。方法:采用优化FOXO1-DNA的基因序列和低温诱导的方式实现FOXO1-DBD蛋白的可溶性表达,通过镍亲和层析及阳离子交换层析进行纯化,并经凝胶迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)验证FOXO1-DBD的DNA结合特性。结果:优化后的FOXO1基因在21 ℃时编码的蛋白大多以可溶性方式表达,通过两步纯化即可获得95%以上纯度的FOXO1-DBD蛋白,纯化的蛋白与含FOX家族DNA结合基序(G/ATAAACA)的DNA序列显示良好的结合特性。结论:建立了FOXO1-DBD蛋白高效表达、纯化的方法,验证了FOXO1蛋白在识别DNA上的复杂性 %K FOXO1 %K DNA结合域 %K 表达纯化 %K 凝胶迁移实验 %K < %K br> %K FOXO1 %K DNA binding domain %K expression and purification %K electrophoretic mobility shift assay %U http://xbyxb.csu.edu.cn/xbwk/CN/abstract/abstract3804.shtml