%0 Journal Article %T 应用RNAi敲减MARCH6基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖及#br# 周期的影响<br>Inhibition of cellular proliferation by knockdown of MARCH6 gene expression in breast cancer cells %A 沈妮 %A 王玉洁 %A 周卫兵 %A 王展 %A 涂青松 %A 姜武忠< %A br> %A SHEN Ni %A WANG Yujie %A ZHOU Weibing %A WANG Zhan %A TU Qingsong %A JIANG Wuzhong %J 中南大学学报(医学版) %D 2016 %R 10.11817/j.issn.1672-7347.2016.10.001 %X 目的:应用慢病毒介导的RNAi技术,在乳腺癌MCF-7细胞中敲减MARCH6基因的表达,研究其对MCF-7细胞增殖及细胞周期的影响。方法:靶向MARCH6基因的shRNA慢病毒转染293T细胞后,在荧光显微镜下观察转染效率;收集慢病毒液感染MCF-7细胞后,应用实时荧光PCR和Western印迹验证RNAi敲减MARCH6基因后,MARCH6基因mRNA和蛋白的表达影响;应用MTT,BrdU细胞增殖实验检测细胞增殖能力的变化;采用增殖指数染色流式细胞术检测细胞周期和增殖的改变。结果:通过在荧光显微镜下观察,MARCH6 shRNA慢病毒质粒成功转染293T细胞,与同明视野对比,可见80%左右的细胞带绿色荧光;感染MCF-7细胞,90%的细胞均带绿色荧光; 实时荧光PCR和Western印迹验证了MARCH6 shRNA慢病毒感染MCF-7细胞后,MARCH6在转录水平和蛋白水平表达均显著下降;MTT实验、BrdU法结果显示MARCH6基因敲减组的MCF-7细胞增殖显著下降(P<0.01),流式细胞术分析显示MARCH6敲减后MCF-7细胞出现细胞周期抑制,细胞分裂处于G1期细胞数明显增多,增殖指数显著降低。结论:敲减乳腺癌MCF-7细胞的MARCH6基因表达后,抑制了MCF-7细胞的增殖,并引起细胞周期G1期阻滞。提示MARCH6通过影响细胞周期的进展,促进乳腺癌细胞的增殖 %K MARCH6 %K RNA干扰 %K 细胞增殖 %K < %K br> %K MARCH6 %K RNA interference %K cell proliferation %U http://xbyxb.csu.edu.cn/xbwk/CN/abstract/abstract3742.shtml