%0 Journal Article %T Accutase 消化传代对人胚胎纹状体来源神经干细胞凋亡的影响<br>Effect of accutase dissociation and passage on the apoptosis#br# of human striatum derived neural stem cells %A 李婷 %A 王小莉 %A 宋娟 %A 李晨 %A 张翠英 %A 赵杰 %A 王金胜< %A br> %A LI Ting %A WANG Xiaoli %A SONG Juan %A LI Chen %A ZHANG Cuiying %A ZHAO Jie %A WANG Jinsheng %J 中南大学学报(医学版) %D 2015 %X 目的:观察人类胚胎纹状体来源神经干细胞(neural stem cells,NSCs)经消化酶accutase消化传代后是否 发生了大量细胞凋亡。方法:提取人13~18周自然流产胚胎脑组织纹状体的NSCs,体外形成神经球并培养至3~5 代。经消化酶accutase消化后传代,运用活性caspase-3染色、TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)染色等方 法对多聚甲醛固定的NSCs进行凋亡检测,同时采用Annexin V和Hoechst33342/PI等联合染色方法对活细胞进行凋亡 鉴定,以确定NSCs在体外传代后的凋亡情况。结果:在传代后检测的3个时间点(1,24,72 h)中TUNEL染色和活 性caspase-3染色均高度重合。传代后1 h,TUNEL和活性caspase-3染色所检测到的凋亡率为20%~25%,传代后24 h增 高为75%~80%(P<0.01),而传代后72 h,由于存活下来的细胞开始增殖,所以整体凋亡率降为60%~70%,明显低于 24 h(P<0.01)。结论:由人类纹状体来源NSCs形成的神经球,经accutase消化传代后24 h内即发生大量细胞凋亡。对于 体外培养的NSCs,抑制其凋亡可能是促使其自我更新和增殖,最终起到提高细胞扩增能力的有效手段 %K 神经干细胞 %K 神经球 %K accutase %K TUNEL %K 凋亡 %K 活性caspase-3 %K < %K br> %K neural stem cells %K neurospheres %K accutase %K TUNEL %K apoptosis %K active caspase-3 %U http://xbyxb.csu.edu.cn/xbwk/CN/abstract/abstract3419.shtml