%0 Journal Article %T 变异链球菌丙氨酸消旋酶基因表达纯化及活性测定<br>Gene Expression, Purification, and Activity Determination of Alanine Racemase from <i>Streptococcus Mutans</i> %A 郭笑 %A 邱伟 %A 周学东 %A 程磊 %A 李明云< %A br> %A GUO Xiao %A QIU Wei %A ZHOU Xue-dong %A CHENG Lei %A LI Ming-yun %J 口腔医学研究 %D 2018 %R 10.13701/j.cnki.kqyxyj.2018.06.006 %X 摘要 变异链球菌是口腔主要的龋病病原菌。丙氨酸消旋酶通过合成右旋丙氨酸(D-alanine,D-ala)参与细菌细胞壁肽聚糖的生物合成过程,与细菌性疾病密切相关,近年来成为抗菌药物的又一理想靶位。D-环丝氨酸(D-cycloserine,DCS)是丙氨酸消旋酶不可逆性抑制剂。本研究通过聚合酶链反应克隆变异链球菌UA159的smu.1834c基因,经过酶切、连接,构建重组表达质粒pET-smu.1834c,诱导表达重组,纯化蛋白。测定DCS对丙氨酸消旋酶活性的抑制作用。成功诱导表达纯化smu.1834c基因编码蛋白,具有体外催化L-丙氨酸生成D-丙氨酸的活性。发现DCS能够抑制该蛋白的活性。本研究证实变异链球菌smu.1834c基因编码丙氨酸消旋酶。DCS能够抑制其活性,并且呈现一定的剂量相关性 %K 变异链球菌 %K 丙氨酸消旋酶 %K 右旋丙氨酸 %K D-环丝氨酸 %K < %K br> %K < %K i> %K Streptococcus mutans< %K /i> %K Alanine racemase %K D-alanine %K D-cycloserine %U http://manu45.magtech.com.cn/Jwk_kqyxyj/CN/abstract/abstract1333.shtml