%0 Journal Article %T 变形链球菌耐氟菌株gtfB基因失活菌株的构建<br>Construction of Streptococcus Mutans Fluoride-resistant Strain with GtfB Gene Inactive. %A 李文月 %A 高爽 %A 张志鹰 %A 张红 %A 超博 %A 武玉凤 %A 李贺 %A 王春萌 %A 张志民< %A br> %A LI Wen-yue %A GAO Shuang %A ZHANG Zhi-ying %A ZHANG Hong %A CHAO Bo %A WU Yu-feng %A LI He %A WANG Chun-meng %A ZHANG Zhi-min %J 口腔医学研究 %D 2018 %R 10.13701/j.cnki.kqyxyj.2018.05.008 %X 摘要 目的:构建变形链球菌(S.mutans)耐氟菌株UA159-FR中gtfB基因失活株,为研究耐氟菌株gtfB基因的功能奠定基础。方法:培养UA159-FR并以其为模板扩增gtfB基因上游、下游同源臂片段,以质粒pEGFP-N1为模板扩增kan基因;通过重叠延伸聚合酶链反应法(overlap extension polymerase chain reaction,OE-PCR)获取上述3个片段的同源重组片段;与pEASY-Blunt Cloning Vector连接形成重组质粒后,进行PCR鉴定和测序鉴定;将重组片段电转化入UA159-FR感受态细胞中得到gtfB基因失活菌株,并进行PCR鉴定。结果:经PCR鉴定和测序鉴定,含有gtfB基因重组片段的重组质粒构建成功;经PCR鉴定,UA159-FR的gtfB基因失活株构建成功。结论:成功构建了含有gtfB基因重组片段的重组质粒和S.mutans耐氟菌株UA159-FR的gtfB基因失活株,可用于gtfB基因功能的研究 %K 变形链球菌耐氟菌株 %K gtfB基因 %K 重叠延伸聚合酶链反应 %K 同源重组 %K 基因失活 %K < %K br> %K Fluoride-resistant streptococcus mutans %K GtfB gene %K Overlap extension polymerase chain reaction %K Homologous recombination %K Gene inactivation %U http://manu45.magtech.com.cn/Jwk_kqyxyj/CN/abstract/abstract1308.shtml