%0 Journal Article
%T Apidaecin型抗菌肽在毕赤酵母菌中的基因工程表达<br>Expression and Identification of Apidaecin in Pichia Pastoris.
%A 施文
%A 马瑞
%A 周建业
%A 陈莉娅
%A 马媛媛
%A 黄慧敏
%A 张小凤
%A 易根云
%A 李志强&lt
%A br&gt
%A SHI Wen
%A MA Rui
%A ZHOU Jian-ye
%A CHEN Li-ya
%A MA Yuan-yuan
%A HUANG Hui-min
%A ZHANG xiao-feng
%A YI Geng-yun
%A LI Zhi-qiang.
%J 口腔医学研究
%D 2017
%R 10.13701/j.cnki.kqyxyj.2017.05.002
%X 摘要 目的;利用基因工程的方法,在毕赤酵母菌(Pichia patoris,P. pastoris)中成功表达Apidaecin型抗菌肽。方法:利用PCR技术在Apidaecin基因N端插入EcoR I 酶切位点、GST标签(并连接DDDDK肠激酶位点),且在C端插入终止密码子和Not I酶切位点,后将上述片段扩增后与表达载体pPICZαA连接,构建重组表达载体pPICZαA-GST-Apidaecin,并测序鉴定;将pPICZαA-GST-Apidaecin重组质粒电转至P. pastoris X33中并进行发酵表达;表达产物经GST亲和层析纯化后进行SDS-PAGE凝胶电泳鉴定,EK肠激酶切除GST标签后进行抑菌实验。结果:SDS-PAGE凝胶电泳结果显示GST-Apidaecin融合蛋白表达的产物条带位于分子量约为28KD处,与理论分子量一致; 抑菌实验表明,用EK肠激酶切除GST融合标签后,Apidaecin型抗菌肽对大肠杆菌有明显的抑菌活性。结论:Apidaecin型抗菌肽在P. pastoris菌中得到成功表达并具有抑菌活性
%K 抗菌肽
%K Apidaecin
%K 毕赤酵母菌
%K &lt
%K br&gt
%U http://manu45.magtech.com.cn/Jwk_kqyxyj/CN/abstract/abstract984.shtml