%0 Journal Article
%T 理性设计提高乙醇脱氢酶LbADH的催化活性 Improvement of Catalytic Activity of Alcohol Dehydrogenase LbADH by Rational Design
%A 王加丽
%A 杨怡
%A 瞿旭东
%J 武汉大学学报(理学版)
%D 2017
%X 来源于革兰氏阳性短乳杆菌Lactobacillus brevis ATCC 367的乙醇脱氢酶LbADH是催化手性醇的模式酶,以四聚体的形式发挥催化活性.本研究通过计算机分子模拟进行理性设计,确定并设计LbADH中与单体间疏水相互作用及盐桥键形成相关的关键位点,通过定点突变在原始序列中引入相应的氨基酸,以改变单体间的结合能力,定向调节其催化活性和热稳定性.研究获得一个疏水突变体LbADH F146L,其在37℃下的酶活力为野生酶的8.5倍,在50℃下的酶活力为野生酶的5.6倍;其动力学参数Kcat/Km(1.99×106 L·mol-1·s-1)为野生酶(1.40×104 L·mol-1·s-1)的142倍,表明其催化效率明显提高.该研究结果表明,通过将LbADH中146位的苯丙氨酸(F146)突变为亮氨酸(L)增大疏水作用可以提高其催化活性
%K 乙醇脱氢酶
%K 分子模拟
%K 酶活力
%K 动力学
%K 疏水作用
%K 理性设计
%U http://whdy.cbpt.cnki.net/WKD/WebPublication/paperDigest.aspx?paperID=4b9f8c2d-d7f0-4c65-af51-b9ca1362e765