%0 Journal Article %T 基于ThT荧光寿命检测蛋清溶菌酶蛋白寡聚体 %A 李成 %A 宋吉雪 %A 刘婷婷 %A 李妍 %A 刘冰南 %A 王亮 %A 肖珊 %A 李琳 %A 耿旭辉 %A 王际辉 %J 高等学校化学学报 %D 2019 %X 摘要 采用时间分辨荧光技术,检测了不同形态蛋白聚集体的荧光染料硫磺素T(ThT)荧光寿命.利用蛋清溶菌酶体外制备了蛋白聚集体;采用透射电子显微镜(TEM)及ThT稳态荧光检测了结合蛋白纤维生长的动力学曲线,确定其形成寡聚体及纤维样聚集体的特征和时间.通过时间相关单光子计数(TCSPC)技术测定了蛋清溶菌酶单体、寡聚体和淀粉样纤维的ThT荧光寿命曲线,并拟合、计算其荧光寿命.根据圆二色谱(CD)分析结果推测聚集体的结构不同导致其与ThT的结合状态不同,从而影响ThT荧光寿命.结果表明,通过测定ThT荧光寿命可以区分蛋白单体、寡聚体和纤维样聚集体,并监测蛋白寡聚体的形成,为后续病理蛋白聚集过程中形成寡聚体物质的监测提供了研究基础 %K 寡聚体 %K 硫磺素T %K 时间相关单光子计数 %K 荧光寿命 %U http://www.cjcu.jlu.edu.cn/CN/abstract/abstract28694.shtml