%0 Journal Article
%T Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的培养、纯化和鉴定
%A 仇海文
%A 刘 梅
%A 刘振州
%A 孙胜楠
%A 李 卉
%A 马雪梅
%J 南京师范大学学报(自然科学版)
%D 2017
%R 10.3969/j.issn.1001-4616.2017.03.019
%X 类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)病人滑膜成纤维细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS)是研究RA发病机制和进行RA药物筛选的最理想的细胞来源. 但是对于众多非医疗机构的高校和科研院所而言,由于RA病人滑膜组织不易获取而难以进行细胞水平的操作. 因此,建立胶原诱导的关节炎大鼠(Collagen-induced arthritis,CIA)模型,成功分离膝关节滑膜组织并进行滑膜成纤维细胞的原代培养和纯化,将有效解决RA FLS的来源问题,为后续实验奠定基础. 本实验通过皮内和皮下两次注射鸡Ⅱ型胶原诱导Wistar大鼠罹患关节炎,通过关节炎指数评分和膝关节HE染色明确CIA模型的建立; 分离膝关节滑膜组织,采用Ⅱ型胶原酶和无EDTA胰酶消化法分离细胞并进行传代培养,传至第三代时,细胞免疫荧光检测细胞中VCAM-1蛋白含量以鉴定细胞纯度. 结果显示,滑膜组织经过消化和培养后得到大量大鼠滑膜成纤维细胞; 在显微镜下观察所得细胞呈梭形树突状,具有成纤维样细胞特征; VCAM-1蛋白阳性细胞达98%以上,确证所分离细胞为滑膜成纤维样细胞,且纯度极高. 本研究建立了较简便快捷地获得大量滑膜成纤维细胞的方法,为RA的发病机制研究和药物防治提供了丰富的实验材料
%K 滑膜成纤维细胞
%K 胶原诱导的关节炎大鼠模型
%K 原代培养
%K 类风湿关节炎
%U http://njsfdxzrb.paperonce.org/oa/darticle.aspx?type=view&id=201703019