%0 Journal Article %T 小球藻亲环蛋白A的酶活性及过表达拟南芥抗盐性分析<br>Prokaryotic Expression,Activity Assay of Chlorella Cyclophilin A and Salt Tolerance Analysis of <em>Arabidopsis</em> Over-expressing CsCyp1A %A 廖栩 %A 何明良 %A 张素艳 %A 马海燕 %A 王旭辉 %A 罗秋香 %A 管清杰< %A br> %A LIAO Xu %A HE Ming-Liang %A ZHANG Su-Yan %A MA Hai-Yan %A WANG Xu-Hui %A LUO Qiu-Xiang %A GUAN Qing-Jie %J 植物研究 %D 2017 %R 10.7525/j.issn.1673-5102.2017.05.012 %X 在前期研究中分离到噬碳酸盐小球藻(Chlorella sp.X1)的亲环蛋白基因CsCyp1A(登录号:KY207381),编码CsCyp1A蛋白是否具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性功能是进一步研究它参与小球藻耐盐生物学过程的基础。通过His标签的pQE-30-CsCyp1A原核蛋白表达载体,经IPTG诱导它的E.coli M15菌株表达融合蛋白,Nitra-柱纯化后获得纯化的30 kDa左右的His-CsCyp1A融合蛋白质,Western杂交检测到HisCsCyp1A蛋白的杂交信号。酶活性分析显示,HisCsCyp1A融合蛋白中生色基团的产生速度明显快于对照,表明CsCyp1A蛋白可以催化底物N-succinyl-Xaa-Pro-Phe-p-nitroanilide中Xaa-Pro肽键的顺反折叠,说明纯化的CsCyp1A蛋白具有PPIase活性。典型的亲环蛋白家族成员具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性,参与折叠和转运、信号转导、免疫调节、细胞凋亡等生物学过程。真空渗入法侵染转化的拟南芥在35S启动子驱动下超表达CsCyp1A基因,耐盐性研究表明它提高了过表达株系对NaCl胁迫的耐性,揭示小球藻CsCyp1A基因的抗盐性功能,它将成为抗逆育种的基因资源。本研究也为探索小球藻亲环蛋白A的抗盐碱胁迫生物学作用和分子育种奠定了基础。<br %K 噬碳酸盐小球藻 %K 盐碱地 %K 亲环蛋白A %K 肽脯氨酰顺反异构酶 %K 原核表达蛋白 %K < %K br> %K phytococcal chlorella %K saline-sodic soil %K cyclophilin A %K peptide prolyl cis-trans isomerase %K prokaryotic expression protein %U http://bbr.nefu.edu.cn/CN/abstract/abstract3618.shtml