%0 Journal Article %T 牛eIF5基因原核表达与蛋白纯化 Prokaryotic expression and protein purification of gene bovine eIF5 %A 高学军 %A 臧艳丽 %A 魏诚杰 %A 骆超超 %J 东北农业大学学报 %D 2016 %X 研究应用PCR方法扩增牛e IF5基因编码序列,通过Eco RⅠ和SalⅠ酶切位点将其定向插入p GEX-4T-1载体,构建原核表达重组质粒p GEX-4T-1-e IF5,并转化大肠埃希菌BL21。酶切和测序鉴定正确后,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)大量诱导表达,利用GST-Sepharose 4B亲和珠纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定。结果表明,原核表达载体p GEX-4T-1-e IF5构建成功,Western Blot证实融合蛋白大量表达,纯化后获得GSTe IF5融合蛋白,为深入研究牛e IF5蛋白功能奠定基础。 %K 牛 %K eIF5 %K 克隆 %K 原核表达 %K 纯化 %U http://dbdn.cbpt.cnki.net/WKD/WebPublication/paperDigest.aspx?paperID=a82ba343-8c7c-4fac-a69a-485b3ab02ec4