%0 Journal Article
%T 内含肽融合标签介导的人乙醛脱氢酶2基因原核表达 Expression of recombinant human aldehyde dehydrogenase 2 by using intein induced expression system
%A 刘向宇
%A 尹杰超
%A 李景鹏
%J 东北农业大学学报
%D 2016
%X 为获得高活性重组人乙醛脱氢酶2(ALDH2)重组蛋白,研究通过PCR获得ALDH2基因,先后构建克隆和表达载体p GEM-ALDH2和p TYB11-ALDH2。转化的阳性重组菌经IPTG诱导,SDS-PAGE显示融合蛋白获得大量表达。通过正交试验对表达条件优化设计,结果表明,诱导OD值0.3,30℃,IPTG浓度1.0 mmol·L-1,诱导表达4 h为最优表达条件。由于融合蛋白以包涵体形式存在,经变性、复性,使用IMPACTTM-CN蛋白纯化系统,经内含肽标签蛋白自裂解洗脱、纯化,获得仅含有几个载体氨基酸的ALDH2蛋白,蛋白浓度为0.045 mg·m L-1。纯化的ALDH2蛋白比活力为462 U·mg-1。
%K 人乙醛脱氢酶2
%K 内含肽
%K 重组表达
%K 包涵体
%K IMPACTTM-CN蛋白纯化系统
%U http://dbdn.cbpt.cnki.net/WKD/WebPublication/paperDigest.aspx?paperID=85259b3b-2947-4987-aafa-34cd882b8d35