%0 Journal Article %T 四倍体小麦Langdon HMT1基因的克隆及原核表达 %A 吴丽军 %A 尚 %A 玥 %A 刘 %A 韬 %A 陈文杰 %A 刘宝龙 %A 张连全 %A 刘登才 %A 张 %A 波 %A 张怀刚 %J 麦类作物学报 %D 2017 %R 10.7606/j.issn.1009-1041.2017.09.01 %X 硒是人类不可缺少的重要微量元素之一,人类必须补充足够的硒才能保证身体健康。同型半胱氨酸甲基转移酶(homocysteine-S-methyltransferase,HMT)基因与植物富硒关键酶硒代半胱氨酸甲基转移酶(selenocysteine methyltransferase,SMT)基因同源。为了发掘并利用麦类作物中的富硒关键酶基因,基于NCBI已公布的节节麦(Aegilops tauschii Coss.)同型半胱氨酸甲基转移酶1基因( AetHMT1)的序列设计 HMT1基因的特异性引物H1-F/H1-R,克隆四倍体小麦Langdon HMT1的开放阅读框(open reading frame,ORF)后进行序列分析,并通过原核表达验证该基因。结果表明,利用H1-F/H1-R从四倍体小麦Langdon(LDN)克隆出两条长度均为975 bp的序列,分别命名为 LDNHMT1-1和 LDNHMT1-2。 LDNHMT1-1、 LDNHMT1-2与 AetHMT1基因一样,均编码342个氨基酸,分子量大小分别为35.19 kDa和35.18 kDa。通过氨基酸序列比对和进化树分析发现, LDNHMT1-1、LDNHMT1-2与其他HMT、SMT有较高的相似性。构建原核表达载体,并通过SDS-PAGE鉴定,成功获得 LDNHMT1-1、 LDNHMT1-2的原核表达菌株,且原核表达的蛋白质与预测分子量大小一致。 %K 四倍体小麦Langdon %K 硒 %K 同型半胱氨酸甲基转移酶 %K 基因克隆 %K 原核表达 %U http://mlzwxb.alljournals.ac.cn/mlzwxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20170901&flag=1