%0 Journal Article %T 棉花磷脂酶C基因的克隆及参与油脂代谢的功能分析 %A 梁 %A 卓 %A 谭 %A 兰 %A 袁哈利 %A 谢全亮 %A 王 %A 斐 %A 李鸿彬 %J 西北植物学报 %D 2015 %X 以陆地棉胚珠和纤维为实验材料,利用RT-PCR技术克隆得到磷脂酶C(Phospholipase C,PLC)基因(GhPLC,GenBank登录号:KR154219),将棉花磷脂酶C基因转化拟南芥,分析其在油脂代谢过程中的重要作用。测序鉴定显示,GhPLC基因的全长开放读码框为1 524 bp,编码包含508个氨基酸的蛋白质,理论分子量约为55 kD。序列比对分析显示,GhPLC 属于典型的碱性磷酸酶超家族的磷脂酶。利用pET32a-GhPLC原核表达获得分子量约为55 kD左右的重组蛋白GhPLC;酶活力分析显示,重组GhPLC蛋白具有较高的将卵磷脂(PC)催化为二酰甘油(DAG)的酶活力。半定量RT-PCR结果表明,GhPLC基因参与棉花种子和纤维发育过程。构建植物过量表达载体35S∷GhPLC并转化哥伦比亚野生型拟南芥,转基因拟南芥中GhPLC基因的表达和PLC酶活力显著提高,且转基因拟南芥种子的油脂含量提高了5.3%。 %K 棉花 %K 胚珠和纤维 %K 磷脂酶C %K 油脂含量 %K 拟南芥 %U http://xbzwxb.cnjournals.com/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20150603&flag=1