%0 Journal Article %T CRISPR/Cas9介导靶向敲除拟南芥GGB基因突变体的鉴定 %A 雷建峰 %A 徐新霞 %A 李 %A 月 %A 代培红 %A 刘 %A 超 %A 刘晓东 %J 西北植物学报 %D 2016 %X GGB是抗旱负调控基因。为了获得拟南芥ggb突变体材料,构建了以拟南芥U6启动子驱动GGB sgRNA的CRISPR/Cas9基因组编辑载体。将构建好的编辑载体利用农杆菌介导的浸花法转化野生型拟南芥。对转基因后代GGB基因的测序结果分析发现,在靶位点处有缺失4个碱基和增加1个T碱基的2种突变体产生。分别对野生型拟南芥和上述2种ggb突变体进行半定量RT PCR分析结果显示,突变体材料中几乎检测不到GGB基因表达,说明获得了GGB基因敲除突变体。对野生型和ggb突变体叶片失水率、耐旱表型及单株种子量的测定结果表明,与野生型相比,拟南芥GGB基因突变后,叶片失水率显著减少,抗旱性明显增强,而单株种子量却并没有改变。研究表明,GGB是一种理想的作物分子育种的候选靶基因,获得的突变体为今后从农作物中克隆的GGB同源基因进行功能互补验证提供了有用的遗传材料。 %K 拟南芥 %K CRISPR/Cas9 %K GGB %K 基因敲除 %K 失水率 %U http://xbzwxb.cnjournals.com/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20160501&flag=1