%0 Journal Article
%T 石蒜LrP5CS基因的克隆与表达特性分析
%A 徐
%A 晟
%A 江宜龙
%A 蒋明敏
%A 卜
%A 多
%A 傅江燕
%A 夏
%A 冰
%A 汪
%A 仁
%J 西北植物学报
%D 2015
%X Δ1 吡咯啉 5 羧酸合成酶（P5CS）是植物渗透胁迫下谷氨酸途径合成脯氨酸的关键酶。该研究以石蒜（Lycoris radiata）为材料，采用同源克隆、RACE方法结合RT PCR技术克隆获得LrP5CS基因全长cDNA序列。序列分析表明，LrP5CS基因全长2 521 bp，其中开放阅读框（ORF）为2 139 bp，编码713个氨基酸，预测编码蛋白质的分子量为77.19 kD，等电点为6.34；LrP5CS是1个稳定的疏水蛋白，不含信号肽，不具有跨膜结构，具有AAK超基因家族和ALDH SF超基因家族的保守结构域。氨基酸序列比对和系统进化树分析发现，LrP5CS与植物其他P5CS蛋白具有较高的一致性，且与海枣PdP5CS及油棕EgP5CS聚为一类，亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析结果表明，LrP5CS在根、鳞茎和叶片中均有表达，其中在鳞茎中的表达量最高。LrP5CS在20%聚乙二醇（PEG）处理下的表达模式分析发现，LrP5CS受PEG胁迫处理的诱导表达，其基因相对表达量在处理后6 h达到最高；随着处理时间的延长，LrP5CS基因相对表达量水平逐渐下调至对照水平。将LrP5CS连接到表达载体pET 28a上，转化获得LrP5CS编码基因的大肠杆菌BL21（DE3）工程菌，通过IPTG诱导表达，SDS PAGE分析表达产物发现成功表达目的蛋白。该研究结果为进一步分析LrP5CS基因功能及石蒜抗逆分子育种奠定了基础。
%K 石蒜
%K P5CS
%K 脯氨酸
%K 序列分析
%U http://xbzwxb.cnjournals.com/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20151001&flag=1