%0 Journal Article %T 板栗咖啡酸氧甲基转移酶基因CmCOMT的克隆及原核表达 %A 刘裕峰 %A 朱天辉 %A 刘应高 %A 李姝江 %A 龙旭梅 %A 余鹏举 %A 韩 %A 珊 %J 西北植物学报 %D 2017 %X 该研究根据板栗(Castanea mollissima Bl.)cDNA文库分析得到EST序列,采用RT PCR技术,克隆板栗咖啡酸氧甲基转移酶(caffeic acid O methyltransferase,COMT)基因全长cDNA(CmCOMT),分析其编码蛋白的相关信息并进行原核表达研究,为板栗木质素合成关键酶基因CmCOMT的生物学功能研究与应用奠定基础。结果表明:(1)CmCOMT基因(GenBank登录号为KU365322)具有一个1 098 bp开放阅读框(ORF),共编码365个氨基酸,推测蛋白分子质量为39.684 9 kD,理论等电点为5.83,具有植物SAM依赖甲基转移酶的典型特征。(2)CmCOMT核苷酸序列及其编码氨基酸序列与垂枝桦(Betula pendula)和白桦(Betula platyphylla)的相应序列一致性均在90%以上;同源建模表明,CmCOMT的3D模型与苜蓿(Medicago sativa)MsCOMT的蛋白结构相似,推测其可能与MsCOMT具有相似的功能;系统发育树分析显示,CmCOMT与其他植物COMTs具有相同的进化祖先,与桦木科植物物种亲缘关系最近。(3)SDS PAGE电泳分析表明,CmCOMT蛋白最佳诱导表达条件为0.3 mmol/L IPTG在25 ℃下诱导6 h,蛋白分子量约为44 kD,其主要以可溶性蛋白的形式存在。 %K 板栗 %K 咖啡酸氧甲基转移酶 %K 基因克隆 %K 原核表达 %U http://xbzwxb.cnjournals.com/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20171204&flag=1