%0 Journal Article
%T 华南象草Pp4CL基因的克隆及其转基因烟草木质素含量分析
%A 钟天秀
%A 李有涵
%A 李
%A 菲
%A 彭小群
%A 柯善文
%A 陈
%A 曙
%A 解新明
%J 西北植物学报
%D 2015
%X 为探究华南象草(Pennisetum purpureum cv.Huanan)木质素合成关键酶基因的调控机制,通过同源克隆得到华南象草4-香豆酸:CoA连接酶基因(Pp4CL)的cDNA序列,长度为1 943 bp,其中编码区序列1 662 bp。Pp4CL蛋白由553个氨基酸组成,分子量为59.57 kD,等电点为5.2,属于疏水性蛋白。该蛋白含有AMP结合结构域,属于AFD Class Ⅰ超家族。在系统进化分析中,Pp4CL与At4CL1、Os4CL1遗传距离最近,聚为一支。Pp4CL氨基酸序列具有SSGTGLPKGV和GEICIRG等2个保守基序,是典型的植物4CL。构建原核表达载体pGEX-4CL,得到约88 kD的Pp4CL-GST融合蛋白,为Pp4CL酶活性测定及Western免疫印迹分析奠定了基础。同时构建植物表达载体pBA-4CL,并通过叶盘法对烟草进行了遗传转化,得到3个转基因阳性株系(OX-9、OX-7、OX-4),它们中叶柄木质素总含量分别比非转基因植株(对照)提高了10.0%、16.2%和94.6%,茎秆基部节木质素总含量分别比对照提高了0.9%、4.0%和13.5%。研究结果表明,Pp4CL蛋白与木质素合成有关,过表达Pp4CL基因能够显著提高植株木质素含量。该研究结果为华南象草木质素改良工作打下了基础,同时也为深入开展牧草分子育种提供了依据。
%K 华南象草
%K 木质素
%K 4CL基因
%K 转基因烟草
%U http://xbzwxb.cnjournals.com/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20151201&flag=1